PBS

PBS son las siglas de Phosphate Buffered  Saline, una solución imprescindible para cualquier laboratorio.

Es un tampón isotónico que gracias a los fosfatos, mantiene estable el pH, y como por su composición no es tóxico para las células, tiene diversos usos en el laboratorio: diluir otros reactivos, lavados de células y tejidos en diferentes técnicas,…

Lo podemos encontrar en varios formatos: ya listo para usar, 10 veces más concentrado (sólo lo debemos diluir), en sobre o pastillas listos para verter en el volumen de agua indicado, etc. Pero cuanto más “masticado” nos lo den, más caro es el producto, y si lo pensamos, simplemente se trata de mezclar una cantidad concreta de sales específicas en un volumen determinado de agua y ajustar el pH para acabar.

Nosotros, la verdad es que si es para utilizar en cultivos celulares, lo compramos “ready to use”, más que nada por esterilidad y estandarizar su composición, pero si es para “uso de batalla”,  nos lo preparamos nosotros mismos 10 veces más concentrado, y lo diluimos cuando lo vayamos a usar, de manera que el laboratorio siempre hay una botella de 1 litro PBS 10x que usamos para preparar una garrafa de 10 litros de 1x, y de aquí nos vamos sirviendo cada uno.

Así, para preparar 1 litro de PBS 10x necesitamos:

14.4  gr Na₂HPO₄  (fosfato disódico)

2.2 gr KH₂PO₄ (fosfato de potasio)

2 gr KCl (cloruro potásico)

80 gr NaCl (cloruro sódico)

El pH debe estar entre 7.2 y 7.4.

Procederemos así:

- En un vaso de precipitado de 1 litro, pondremos ±800 ml de H₂O (destilada, milliQ)

- Vertemos las 4 sales en el vaso, introducimos una mosca magnética y dejamos el vaso en un agitador magnético hasta que las sales estén completamente disueltas.

- Comprobamos el pH; suele estar a 6.7, así que lo ajustamos con NaOH 2M (hidróxido sódico, sosa) hasta 7.4

- Verter la disolución en una probeta y enrasar hasta 1 litro.

Para preparar 1 litro de PBS 1x, o lo que es lo mismo “ready to use”, diluimos 100 ml de PBS 10x en 900 ml de H₂O, mezclamos bien y ya está.

Tanto el 10x como el 1x se conservan a temperatura ambiente en perfectas condiciones.

Y ya está! Es algo sencillo, pero útil, no?

Hasta pronto!