PBS son las siglas de Phosphate Buffered Saline, una solución imprescindible para
cualquier laboratorio.
Es un tampón isotónico que gracias a los fosfatos,
mantiene estable el pH, y como por su composición no es tóxico para las
células, tiene diversos usos en el laboratorio: diluir otros reactivos, lavados
de células y tejidos en diferentes técnicas,…
Lo podemos encontrar en varios formatos: ya listo para
usar, 10 veces más concentrado (sólo lo debemos diluir), en sobre o pastillas
listos para verter en el volumen de agua indicado, etc. Pero cuanto más
“masticado” nos lo den, más caro es el producto, y si lo pensamos, simplemente
se trata de mezclar una cantidad concreta de sales específicas en un volumen
determinado de agua y ajustar el pH para acabar.
Nosotros, la verdad es que si es para utilizar en
cultivos celulares, lo compramos “ready to use”, más que nada por esterilidad y
estandarizar su composición, pero si es para “uso de batalla”, nos lo preparamos nosotros mismos 10 veces
más concentrado, y lo diluimos cuando lo vayamos a usar, de manera que el
laboratorio siempre hay una botella de 1 litro PBS 10x que usamos para preparar
una garrafa de 10 litros de 1x, y de aquí nos vamos sirviendo cada uno.
Así, para preparar 1 litro de PBS 10x necesitamos:
14.4 gr Na2HPO4 (fosfato disódico)
2.2 gr KH2PO4 (fosfato de potasio)
2 gr KCl (cloruro potásico)
80 gr NaCl (cloruro sódico)
El pH debe estar entre 7.2 y 7.4.
Procederemos así:
- En un vaso de precipitado de 1 litro, pondremos ±800 ml
de H2O (destilada, milliQ)
- Vertemos las 4 sales en el vaso, introducimos una mosca
magnética y dejamos el vaso en un agitador magnético hasta que las sales estén
completamente disueltas.
- Comprobamos el pH; suele estar a 6.7, así que lo
ajustamos con NaOH 2M (hidróxido sódico, sosa) hasta 7.4
- Verter la disolución en una probeta y enrasar hasta 1
litro.
Para preparar 1 litro de PBS 1x, o lo que es lo mismo
“ready to use”, diluimos 100 ml de PBS 10x en 900 ml de H2O,
mezclamos bien y ya está.
Tanto el 10x como el 1x se conservan a temperatura
ambiente en perfectas condiciones.
Y ya está! Es algo sencillo, pero útil, no?
Hasta pronto!